Es gibt verschiedene Möglichkeiten, die Anwesenheit von Mykoplasmen in einer kontaminierten Zellkultur nachzuweisen. Eine häufig verwendete aber unzuverlässige Methode ist die DAPI Färbung der Zellen mit anschließender mikroskopischer Analyse. Die sichersten Ergebnisse für die Routineuntersuchung liefern jedoch PCR-basierte Methoden. Biontex bietet mit MycoSPY® und MycoSPY® Master Mix schnelle, zuverlässige und äußerst sensitive Kits für den PCR-basierten Mykoplasmennachweis in der Zellkultur an.

Der MycoSPY®-Kit enthält alle notwendigen Reagenzien für eine zuverlässige und spezifische PCR Analyse. Jeder Mykoplasmen Test-Kit enthält Primer Mix, Interne Kontrolle, Taq-Polymerase und einen darauf abgestimmten Taq-Polymerase-Puffer mit Nukleotidtriphosphaten (dNTPs). Die Taq-Polymerase muss bei anderen Produkten oft zugekauft werden und beeinflusst wegen der fehlenden Abstimmung mit dem im Kit enthaltenen Puffer die Sensitivität des Kits.

Wenn eine Kontamination mit Mykoplasmen in Ihrer Zellkultur nachgewiesen wurde, entfernt die hocheffektive Antibiotikamischung MycoRAZOR® Mykoplasmen schnell und effizient.

Literatur:

1. J. J. Jung et al., Stem Cell Reports, 2014, 2: 592–605, doi.org/10.1016/j.stemcr.2014.03.006

2. Arash Yavari et al., Nature Communications, 2017, 8: 1258, DOI: 10.1038/s41467-017-01342-5

Mehr als ein Viertel aller tierischen Zellkulturen sind mit Mykoplasmen / Mollicutes kontaminiert. Die am häufigsten in Zellkulturen gefundenen Stämme mit einer Wahrscheinlichkeit von insgesamt 94% sind: M. fermentans (47%), M. hyorhinis (19%), M. orale (10%), M. arginini (9%), A. laidlawii (6%) und M. hominis (3%). Darüber hinaus wurden folgende Stämme mit geringerer Wahrscheinlichkeit gefunden: M. gallisepticum, M. pneumoniae, M. salivarium, M. synoviae und S. citri. Alle diese Mollicute-Stämme werden neben einer Vielzahl anderer durch MycoSPY® nachgewiesen. Die Verifikation der Primerspezifität wurde per BLAST Analyse durchgeführt. Die folgende Liste zeigt nur Mollicute-Stämme mit 100% Primermatch.