Da es sich um ein neues Produkt handelt, stehen im Moment wenig Application Notes zur Verfügung. Wir sind sehr daran interessiert, ob sich das K4® Transfection System für Ihre Anwendungen eignet. Wir stellen Ihnen daher einen "full-size" Kit oder die von Ihnen benötigte Menge für Ihre Anwendungen kostenfrei zur Verfügung (Angebot zur Kooperation), wenn Sie bereit sind Ihre Ergebnisse mit uns zu teilen.
Eukaryontische Zellen können durch das angeborene Immunsystem zellfremde Substanzen wie zum Beispiel Lipopolysaccharide, bakterielle oder virale Nukleinsäuren und Proteine detektieren und gegen das Eindringen von potenziellen Pathogenen Abwehrmaßnahmen ergreifen oder apoptotische Prozesse anstoßen. Darüber hinaus wird die Anwesenheit eventuell zellschädigender Substanzen den benachbarten Zellen über Botenstoffe mitgeteilt, die dementsprechend in eine Abwehrhaltung übergehen, ohne mit dem Pathogen in Kontakt gekommen zu sein.
Die Erkenntnis, dass auch die Lipofektion von den Abwehrmaßnahmen des angeborenen Immunsystems betroffen ist, führte zur Entwicklung des
K4® Transfection Systems, das aus dem K4® Transfection Reagent und dem
K4® Multiplier besteht. Das K4® Transfection Reagent basiert auf leistungsfähigen kationischen Lipiden, während der
K4® Multiplier die Fähigkeit der Zellen verringert, Nukleinsäuren zu detektieren. Insbesondere schwer zu transfizierende Zellen exprimieren häufig endosomale oder cytosolische Sensoren, die Nukleinsären detektieren können. Der
K4® Multiplier inhibiert im Gegensatz zum
K2® Multiplier als dessen Weiterentwicklung beide Gruppen von Sensoren.
Auf diese Weise können in vielen Fällen erhebliche Steigerungen der Transfektionseffizienz kombiniert mit einer verbesserten Vitalität der Zellen gegenüber herkömmlichen Lipofektionsreagentien erzielt werden.
Das K4® Transfection System ist daher geeignet für die transiente und stabile Transfektion von Säugerzelllinien als auch primären Zellen mit DNA (Plasmide, Bacmide), RNA (mRNA, miRNA und siRNA) und modifizierten Nukleinsäuren (z.B. Antisense Oligonukleotide). Als Anwendungsbereiche sind besonders die Produktion von Proteinen, Antikörpern und Viren (z.B. Adenoviren, AAV, Lentiviren), Kotransfektionen verschiedener Nukleinsäuren, Genome Editing (z.B. CRISPR/Cas9, CRISPR/Cpf1) und Gene Silencing (Gene knockdown) zu nennen.
Das K4® Transfection System ist Bestandteil einer zeitlichen Entwicklungsreihe von Transfektionsreagenzien von Biontex, die insbesondere folgende Reagenzien umfasst: METAFECTENE® < METAFECTENE® PRO < K2® Transfection System < K4® Transfection System. Mit dem Entwicklungsgrad steigt die Wahrscheinlichkeit einer erfolgreichen Transfektion (siehe auch Allgemeine Auswahlhilfe).
